Регламентное сервисное обслуживание и калибровка: Beckman Coulter Aquios CL Flow Cytometer

Beckman Coulter AQUIOS CL Руководство: информация об AQUIOS CL. Проточный цитометр AQUIOS CL использует разделение популяций в качестве индикатора относительной чувствительности и разрешения. SQ (Separation Quotient – коэффициент разделения) отслеживается и проверяет качество анализа образца. Это помогает обеспечить стабильную работу системы на протяжении всего анализа. Использование параметра Separation Quotient на проточном цитометре AQUIOS CL Введение Separation Quotient (SQ) – это математически рассчитанный параметр, специфичный для проточного цитометра AQUIOS CL. Он использует разделение популяций в качестве индикатора относительной чувствительности и разрешения. SQ отслеживается и является хорошим показателем качества образца и анализа. Подробное определение Separation Quotient можно найти в руководстве AQUIOS Tetra System Guide, но его можно понять как разницу между двумя точками SD (стандартного отклонения), деленную на разницу средних значений каналов. Для удобства чтения число умножается на 10. Затем значения выражаются в диапазоне от 99% точек данных в популяциях разделены друг от друга 0–3 | Хорошее разделение >2 SD или примерно 95% точек данных в популяциях разделены друг от друга. 0 | Точка, в которой популяции 2 SD касаются друг друга; примерно 5% точек данных в популяциях перекрываются. -3–0 | Умеренное разделение, при котором >5% точек данных в популяциях перекрываются. < -3 | Плохое разделение, которое ухудшается по мере уменьшения чисел. Separation Quotient используется на проточном цитометре AQUIOS CL: • При анализе контролей SQ используется вместе с другими показателями для определения прохождения или непрохождения QC. • При анализе образцов SQ используется вместе с другими показателями для уведомления пользователя о потенциальной проблеме с образцом или анализом. • SQ отслеживается на графиках Levey-Jennings в качестве постоянного контроля качества системы. ПРИМЕРЫ SEPARATION QUOTIENT (SQ) Ниже приведены примеры отличного, хорошего, умеренного и плохого разделения. Обратите внимание, что на рисунке 3 есть разница в 2 SD между популяциями, что обеспечивает отличное разделение. Сравните это с рисунком 6, где очень небольшая разница между двумя интересующими популяциями. Эта небольшая разница между популяциями считается плохим разделением. Рисунок 3 – Separation Quotient = 4.7 (отличное разделение) Примечание: Рисунок 3 является представителем отличного разделения, поскольку он демонстрирует как хорошую чувствительность, так и хорошее разрешение. Логарифмическая разница средних значений каналов (1) больше, чем две точки стандартного отклонения (2), что указывает на хорошую чувствительность. Кроме того, две популяции клеток имеют небольшую дисперсию в значениях, присвоенных каждой популяции клеток с определенным количеством флуоресценции (3), что указывает на хорошее разрешение. Рисунок 4 – Separation Quotient = 2.3 (хорошее разделение) Примечание: Рисунок 4 является представителем хорошего разделения. Он демонстрирует хорошую чувствительность, но умеренное разрешение. Логарифмическая разница средних значений каналов (1) больше, чем две точки стандартного отклонения, что указывает на хорошую чувствительность. Однако две популяции клеток имеют большую дисперсию в значениях, присвоенных каждой популяции клеток с определенным количеством флуоресценции (2), что указывает на плохое разрешение. Рисунок 5 – Separation Quotient = -0.79 (умеренное разделение) Примечание: Рисунок 5 является представителем умеренного разделения. Он демонстрирует умеренную чувствительность и плохое разрешение. Логарифмическая разница средних значений каналов (1) меньше, чем две точки стандартного отклонения, что указывает на умеренную чувствительность. Кроме того, две популяции клеток имеют умеренную дисперсию в значениях, присвоенных каждой популяции клеток с определенным количеством флуоресценции (2), что указывает на умеренное разрешение. Рисунок 6 – Separation Quotient = -4.7 (плохое разделение) Примечание: Рисунок 6 является представителем плохого разделения. Он демонстрирует хорошее разрешение, но плохую чувствительность. Логарифмическая разница средних значений каналов (1) меньше, чем две точки стандартного отклонения, что затрудняет различение двух популяций клеток, что указывает на плохую чувствительность. Однако две популяции клеток имеют небольшую дисперсию в значениях, присвоенных каждой популяции клеток с определенным количеством флуоресценции (2), что указывает на хорошее разрешение. ВЫВОДЫ Separation Quotient (SQ) – это математически рассчитанный параметр, специфичный для проточного цитометра AQUIOS CL. Проточный цитометр AQUIOS CL использует разделение популяций в качестве индикатора относительной чувствительности и разрешения. SQ отслеживается и является хорошим количественным показателем качества анализа образца, специфичного для приложения. На проточном цитометре AQUIOS CL коэффициент разделения является функцией выравнивания лазера прибора и качества подготовки. Коэффициент разделения используется в качестве формы контроля качества. Separation Quotient помогает сделать проточный цитометр AQUIOS CL экономически эффективным, устраняя необходимость во флуоросферах. Кроме того, SQ делает проточный цитометр AQUIOS CL простым в использовании благодаря количественным значениям SQ, которые облегчают принятие решений лабораторными специалистами. SQ революционизирует идею системы контроля качества, поскольку, в отличие от флуоросфер в традиционных проточных цитометрах, он рассматривает не только QC-анализ, но и продолжает отслеживать производительность системы во время анализа образцов. ГЛОССАРИЙ CV (Coefficient of Variation – коэффициент вариации): Выражение в процентах разброса данных по отношению к среднему. CV% = (SD/Mean) x 100 EV (electronic volume – электронный объем): Относительное измерение, использующее принцип Культера импеданса для измерения относительного объема клеток. Flow cytometry (проточная цитометрия): Технология для измерения характеристик клеток или других биологических частиц по мере их прохождения через измерительный аппарат в потоке жидкости. FS (forward scatter – прямое рассеяние): Лазерный свет, рассеянный под узким углом к оси лазерного луча. Количество прямого рассеяния пропорционально размеру клетки, рассеивающей лазерный свет. Index (индекс): Свойство или отношение, выраженное числом или формулой. Levey-Jennings: График контроля качества, который отображает результаты контролей (по оси y) по времени (по оси x), чтобы проиллюстрировать, хорошо ли работает прибор. Расстояние от среднего измеряется в стандартных отклонениях. Monoclonal antibodies (моноклональные антитела): Антитела, производимые одной клеткой или ее идентичными потомками, специфичные для данного антигена. QC (quality control – контроль качества): Комплексный набор процедур, которые лаборатория устанавливает для обеспечения точной и прецизионной работы прибора. Resolution (разрешение): Способность измерять две частицы с одинаковым количеством флуоресценции и присваивать им одно и то же значение, что позволяет различать две популяции с похожей интенсивностью. SD (standard deviation – стандартное отклонение): Мера отклонения от среднего. Sensitivity (чувствительность): Степень, в которой цитометр может обнаруживать и различать слабую флуоресценцию и немного более яркую флуоресценцию. SQ (Separation Quotient – коэффициент разделения): Разница между двумя точками SD, деленная на разницу средних значений каналов.