Иммуноферментный анализ ELISA.

Обновлено: 05.10.2022

Иммуноферментный анализ ELISA ( английский иммуноферментный анализ , буквально «метод иммуноферментного иммуносорбента», то есть метод твердой поддержки иммуноферментного анализа) является лабораторным исследованием. Этот метод в основном используется для обнаружения наличия антитела или антигена в образце .

Этот метод биохимического анализа попадает в более общие рамки иммуноферментных методов обнаружения (или EIA для иммуноферментных анализов ), в которых отслеживается распознавание антигена, изучаемого конкретным антителом (или, наоборот, антитела, изучаемого антигеном). за счет реакции, катализируемой ферментом, который высвобождает окрашенный компонент, количество которого определяется спектроскопией . Для этого антиген распознается антителом, ковалентно связанным с ферментом (или, наоборот, антитело распознается меченым антигеном). Связывание меченой молекулы после использования хромогенного или флуорогенного субстрата для фермента, связанного с антителом, приведет к испусканию окрашенного или флуоресцентного сигнала. Эти методы должны быть против радиоиммунологическим анализов (или RIA для радио иммуноанализа ) , в котором маркировка осуществляется с помощью радиоэлемента которого радиологического активность измеряют в количестве распадов в секунду. Для облегчения реализации метода, в частности, в случае большого количества образцов, подлежащих анализу, антитело, специфичное для желаемого антигена или антиген, распознаваемый желаемым антителом, связывают с используемой подложкой, которая им покрыта, отсюда и название метода иммуноабсорбции. Существует несколько вариантов операционных протоколов, которые позволяют повысить специфичность или чувствительность распознавания антигена (непрямой, сэндвич-анализ или конкурентный ELISA).

Поскольку ELISA можно использовать для оценки как наличия антигена, так и антитела в образце, он является эффективным инструментом как для определения концентраций антител в сыворотке (как для теста на ВИЧ, так и для теста на ВИЧ. Вирус Нила ), только для обнаружить наличие антигена. Он также нашел применение в пищевой промышленности для обнаружения пищевых аллергенов , таких как молоко , арахис , древесные орехи и яйца . Это простой, легкий в использовании и недорогой тест. Это ограничено доступностью специфических антител.

Резюме

Методология


(1) Планшет покрыт «захватывающим» антителом; (2) образец добавляется, и любой присутствующий антиген связывается с «захватывающим» антителом; (3) добавляется детектирующее антитело, которое связывается с антигеном; (4) добавляется вторичное антитело, связанное с ферментом, которое связывает детектирующее антитело; (5) добавляется ферментный субстрат и преобразуется в определяемую форму (окрашенную или флуоресцентную).

Непрямой ИФА

Чтобы повысить чувствительность обнаружения антигена, антитело, которое распознает желаемый антиген, может не связываться с ферментом, а специфически распознаваться вторым антителом, которое само будет связано с ферментом .

Фермент действует как усилитель: даже если присоединяется небольшое количество антител, конъюгированных с ферментом, фермент катализирует формирование множества сигналов, что делает этот тест очень чувствительным, но также увеличивает количество ложноположительных результатов . Поэтому логически необходимо предусмотреть контрольные скважины.

Этапы так называемого непрямого ИФА, наиболее часто используемого для определения концентрации антител в сыворотке, включают:

  1. Нанесение образца известного антигена на поверхность, чаще всего на поверхность лунки микротитровального планшета. Антиген прикрепляется к поверхности, делая ее неподвижной.
  2. Ополаскивание тарелки моющим средством .
  3. Насыщение чашки неспецифическими белками , чаще всего раствором обезжиренного сухого молока с последующим ополаскиванием моющим средством.
  4. Покрытие лунок (или любой другой поверхности) образцами исследуемой сыворотки (или любым другим образцом), концентрация антител в которых неизвестна, и обычно разбавленных сывороткой другого вида . Использование сыворотки другого вида предотвращает связывание антигена неспецифическими антителами, содержащимися в крови пациента.
  5. Промывание планшета для удаления несвязавшихся антител. После промывания на поверхности лунки остаются только комплексы антиген-антитело.
  6. Добавление в лунки вторичных антител, которые будут связываться с первичным антителом (в данном случае это антиглобулин ). Эти вторичные антитела связаны с ферментом, модифицирующим субстрат, что позволяет следить за ходом реакции.
  7. Второе ополаскивание планшета, чтобы удалить несвязанные антитела.
  8. Нанесение субстрата, который при преобразовании ферментом излучает хромогенный или флуоресцентный сигнал.
  9. Количественная оценка результата визуально или, чаще, с помощью спектрофотометрии или любого другого оптического устройства.

Сэндвич ELISA

Сэндвич-ELISA - менее распространенный (клинический) вариант этого метода, используемый для обнаружения образца антигена в сыворотке или другом образце. С другой стороны, этот метод очень распространен в исследованиях.

В общих чертах процесс происходит следующим образом:

  1. Подготавливается поверхность, и с ней связывается известное количество так называемых захватывающих антител .
  2. На планшет наносят образец, содержащий антиген.
  3. Планшет ополаскивают, чтобы удалить несвязанный антиген.
  4. Добавляются антитела, конъюгированные с ферментом.
  5. Пластина промывается второй раз.
  6. Добавляется субстрат, превращаемый ферментом в флуоресцентный сигнал.
  7. Результат анализируется «на глаз» или на спектрофотометре, специально разработанном для непосредственного приема 96-луночных планшетов.

Однако, как показано, обычно существует дополнительная стадия, добавление детектирующих антител , чтобы избежать создания антител, конъюгированных с ферментом для каждого антигена . Использование связанного фермента, который распознает фрагмент Fc других антител, позволяет использовать его в различных ситуациях и снижает стоимость процедуры.

ИФА по конкурсу

Этот вариант позволяет анализировать антиген, используя принцип конкуренции за связывание:

  1. Готовят пластину, на которой прикрепляются антитела (дефектные).
  2. Смесь меченых антигенов и антигенов, подлежащих анализу (немеченых), откладывается на планшете.
  3. Планшет ополаскивают, чтобы удалить антигены, не связанные с антителами.

Следовательно, существует конкуренция между мечеными антигенами (в известном количестве) и немечеными (в количестве, которое предстоит определить) за их связывание с антителами, которых нет. Таким образом, чем больше количество антигенов, подлежащих анализу, тем больше их доля среди антигенов, удерживаемых антителами, и тем слабее будет сигнал. И наоборот, если исходная концентрация антигена низкая, сигнал будет сильным.

Приложения

ИФА может быть проведен для количественных или качественных целей:

  • при количественном использовании ELISA единицы оптической плотности или флуоресценции образца интерполируются на стандартную кривую, обычно при серийном разведении мишени.
  • качественный результат укажет на наличие или отсутствие антигена в образце. Пороговые значения определяются аналитиком и могут быть статистически обоснованы. Обычно используются два или три стандартных отклонения, чтобы отличить положительный образец от отрицательного.

Количественные тесты (пробы)

Прямой ИФА используется для анализа различных белков. Некоторые примеры, взятые из приложений в медицинской фармакологии: гормоны щитовидной железы, концентрация лекарств (для оценки соблюдения и / или корректировки дозировки ) и т. Д.

Качественные тесты: тест на ВИЧ методом ИФА

Самое известное приложение для широкой публики - это тестирование на ВИЧ первой линии .

Метод ИФА позволяет обнаруживать анти - ВИЧ - антител в крови сыворотке (отсюда термин «серопозитивных» или «серонегативных). Метод обладает высокой чувствительностью ( в большинстве случаев обнаруживаются, и» ложноотрицательных "(= отрицательные тесты , когда пациент серопозитивные) практически исключены, по крайней мере, если тест проводится в течение трех месяцев после контакта с инфекцией) и приемлемой специфичностью (низкий уровень « ложноположительных результатов » (= положительный тест по реакции антитела с неспецифическим антигеном) Однако в случае положительного результата серологического анализа на ВИЧ образцы следует подвергнуть подтверждающим тестам, таким как вестерн-блоттинг , в котором используется методика, основанная на электрофорезе, а частота ошибок чрезвычайно низка.

Где и как пройти тестирование на ВИЧ

photo-HIV-Test.jpg

Наличие или отсутствие ВИЧ-инфекции можно определить только с помощью специального исследования крови (теста). Его цель - обнаружить защитные клетки (антитела), выработанные организмом для борьбы с вирусом. Антитела к ВИЧ можно выявить примерно через три месяца после инфицирования.

Промежуток времени с момента инфицирования до выработки антител называется периодом окна. Если сдать тест в это время, его результат будет отрицательным, несмотря на присутствие в организме вируса. Для подтверждения результат и постановки диагноза необходимо повторное обследование. В «период окна» возможна передача вируса другому человеку.

Если антитела к ВИЧ обнаружены, результат теста называют «положительным», если не обнаружены - «отрицательным».

Погрешность исследования. Всё о возможных ошибках в ВИЧ-диагностике.

Точность диагностики ВИЧ – задача первостепенной важности, ведь ошибка в диагнозе может привести к психологической травме или к распространению ВИЧ. Поэтому для тестирования на ВИЧ используют тест-системы высокого качества. Однако стопроцентной точности не бывает ни при одном обследовании. Получив результат, важно проконсультироваться со специалистом.

Технические ошибки

Результаты обследования на ВИЧ могут оказаться ошибочными, например, из-за несоблюдения правил хранения и транспортировки крови, взятой для анализа на ВИЧ-инфекцию – сейчас в медицинских учреждениях это встречается крайне редко.

Ошибки диагностики у беременных

Ложноположительные результаты определения антител к ВИЧ могут наблюдаться при беременности. В этом случае женщина встаёт на учёт в СПИД-Центр, где проводится наблюдение. Обследование повторяют через 3 месяца – если уровень антител растет, это говорит об инфицировании ВИЧ. Если количество антител остаётся прежним – подозрение на ВИЧ-инфекцию не подтверждается.

Ошибки диагностики при хронических заболеваниях

Ложноположительные результаты могут встречаться также при хронических заболеваниях с нарушенным обменом веществ, например – при сахарном диабете или коллагенозах. Данная диагностическая ошибка может быть следствием других инфекционных или аутоиммунных заболеваний. При онкологических процессах также велика вероятность диагностической ошибки.

Ошибки при обследовании детей, рождённых от ВИЧ-позитивных женщин

У детей, рождённых от ВИЧ-инфицированных женщин, в первые 18 месяцев жизни в крови могут определяться антитела к ВИЧ при отсутствии самой инфекции.

«Серологическое окно»

При определении антител к ВИЧ методом ИФА или иммунного блота возможен ложноотрицательный результат, если ВИЧ-инфицированный пациент находится в периоде «окна» и количество антител ниже пороговых значений, определяемых тест-системами.

Ошибки при нарушении работы иммунной системы

Ложноотрицательный результат может быть при так называемой атипичной реакции иммунной системы – когда не происходит адекватного иммунного ответа на инфекционный процесс. Также ложноотрицательный результат часто бывает на конечных этапах развития заболевания, когда иммунная система ослаблена настолько, что не в состоянии выработать антитела. Другое состояние – длительная иммуносупрессивная терапия, например, после трансплантации органов – в данном случае иммунный ответ также отсутствует.

Когда результат диагностики ВИЧ точно отрицательный

Отрицательный результат тестирования на ВИЧ практически полностью гарантирует отсутствие ВИЧ-инфекции, если у человека в последний год не было ситуаций, сопряжённых с высоким риском заражения ВИЧ и нет клинических признаков, характерных для СПИДа. Если была опасная ситуация с точки зрения заражения ВИЧ, то об отсутствии инфекции можно говорить, если в течение года результаты теста остаются отрицательными.

Федеральным законом РФ № 38ФЗ от 30.03.1995 г. «О предупреждении распространения в Российской Федерации заболевания, вызываемого вирусом иммунодефицита человека (ВИЧинфекции)» определяется, что любой гражданин РФ может обследоваться на предмет наличия у него антител к ВИЧ:

  • добровольно (п. 3 ст. 7);
  • бесплатно в учреждениях государственной и муниципальной систем здравоохранения (п. 7 ст. 7);
  • анонимно по желанию (п. 2 ст. 8)

При желании лицо, прошедшее медицинское освидетельствование, имеет право пройти повторное медицинское освидетельствование в любом учреждении здравоохранения по своему выбору независимо от срока, прошедшего с момента предыдущего освидетельствования (ст. 12).

Медицинское освидетельствование несовершеннолетних в возрасте до 14 лет может проводиться по просьбе или с согласия родителей (законных представителей) (п. 5 ст. 7).

1450266037_vich02.jpg

Категории лиц, которые должны проходить обязательное медицинское освидетельствование на выявление ВИЧ:

1. доноры крови, биологических жидкостей, органов и тканей (п. 1 ст. 9 ФЗ № 38 от 30.03.1995 г.) (отказавшись от такого обследования, они не могут быть донорами (п. 2 ст. 9);

2. работники отдельных профессий, производств, предприятий, учреждений и организаций, проходящих обязательное медицинское обследование при поступлении на работу и периодических медицинских осмотрах (п. 1 постановления Правительства РФ № 877 от 04.09.1995 г.):

3. врачи, средний и младший медицинский персонал центров по профилактике и борьбе со СПИДом, учреждений здравоохранения, специализированных отделений и структурных подразделений учреждений здравоохранения, занятые непосредственным обследованием, диагностикой, лечением, обслуживанием, а также проведением судебно-медицинской экспертизы и другой работы с ВИЧ-инфицированными лицами, имеющие с ними непосредственный контакт;

4. врачи, средний и младший медицинский персонал лабораторий, которые осуществляют обследование населения на ВИЧ-инфекцию и исследование крови и биологических материалов, полученных от лиц, инфицированных ВИЧ;

5. научные работники, специалисты, служащие и рабочие научно-исследовательских учреждений, предприятий (производств) по изготовлению медицинских иммунобиологических препаратов и других организаций, работа которых связана с материалами, содержащими ВИЧ; иностранные граждане и лица без гражданства, прибывающие в Российскую Федерацию на срок свыше 3 месяцев (ст. 10 ФЗ № 38 от 30.03.1995 г.).

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ТЕСТСИСТЕМ ИФА/ИХЛА 4-ГО ПОКОЛЕНИЯ, ПРИМЕНЯЕМЫХ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Целью работы являлось сравнение пяти наиболее широко используемых на территории Российской Федерации тест-систем ИФА для обнаружения антител к вирусу иммунодефицита человека.

Материалы и методы. В качестве материалов для сравнения были собраны 5442 образца сыворотки крови посетителей диагностических центров, пришедших на обследование по показаниям, не связанным с инфекциями, групп населения с высоким риском инфицирования ВИЧ, а также от пациентов с состояниями, при которых чаще всего могут возникнуть ложноположительные результаты исследований в ИФА. Дополнительно для оценки аналитических характеристик использовались сероконверсионные панели и панель вирусного разнообразия. В работе проводилось сравнение следующих тест-систем: Architect HIV Ag/Ab Combo (Abbott), Genscreen Ultra HIV Ag-Ab (Bio-Rad), КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ (АО «Вектор-Бест»), ДС-ИФА-ВИЧ-АГАТ-СКРИН (ООО «НПО «Диагностические системы»), ВИЧ-1,2-АГ/АТ (ООО «Медико-биологический союз»).

Заключение. Диагностическая чувствительность всех тест-систем составила 100% за исключением одной (ООО «Медико-биологический союз»), у которой она оказалась равной 99,54%. Диагностическая специфичность варьировала от 99,58 до 99,89%, однако неожиданно сильно зависела от тестируемой популяции, снижаясь в группе пациентов с высоким риском инфицирования ВИЧ до 93,26% при использовании тест-системы АО «Вектор-Бест». Доля подтвержденных первично положительных результатов колебалась в диапазоне от 100% (Abbott) до 89,51% (АО «Вектор-Бест»). Анализ сероконверсионных панелей показал, что тест-системы незначительно отличались друг от друга, выявляя от 22,12% (ООО «НПО «Диагностические системы») до 27,88% (Abbott) образцов. При тестировании панели вирусного разнообразия большее количество образцов выявляли тест-системы зарубежных производителей (100% — Abbott и 85,9% — Bio-Rad). Наименьшее количество образцов панели было выявлено тест-системой ООО «Медико-биологический союз» (52,1%). Данная работа является единственным исследованием, где на обширной выборке было проведено сравнение серологических тест-систем 4-го поколения, широко использующихся в Российской Федерации для скрининга на ВИЧ-инфекцию. Полученные результаты позволяют оценить эффективность применения перечисленных тест-систем в рутинной диагностической практике.

Ключевые слова

Об авторах

Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора
Россия
руководитель научной группы ВИЧ-инфекции Федерального бюджетного учреждения науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора.

Центр стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровью
Россия
руководитель отдела молекулярной диагностики и эпидемиологии Федерального бюджетного учреждения науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора.

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера; Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И.Мечникова
Россия

д.б.н., зам. директора по инновационной работе, зав. лабораторией иммунологии и вирусологии ВИЧ-инфекции Федерального бюджетного учреждения науки «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; доцент кафедры клинической лабораторной диагностики Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И.Мечникова» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

к.м.н., врач клинической лабораторной диагностики Федерального бюджетного учреждения науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора.

руководитель Референс-центра по вирусным гепатитам Роспотребнадзора, зав. научно-консультативным клинико-диагностическим центром Федерального бюджетного учреждения науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора.

н.с., консультант по лабораторной медицине группы аналитического планирования, врач клинической лабораторной диагностики Федерального бюджетного учреждения науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора.

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера
Россия
н.с. Федерального бюджетного учреждения науки «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора; Российский университет дружбы народов
Россия
академик РАН, зав. специализированной научно-исследовательской лабораторией эпидемиологии и профилактики СПИД Федерального бюджетного учреждения науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзор.

Список литературы

2. Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.5.2826–10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» (ред. от 21.07.2016) / Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 21.07.2016 № 95. М., 2016. [Sanitary and epidemiological rules SP 3.1.5.2826–10 «Prevention of HIV infection» (ed. from 21.07.2016). Resolution of the Chief state sanitary doctor of the Russian Federation from 21.07.2016 № 95. Moscow, 2016 (In Russ.)].

3. ВИЧ-инфекция: Информационный бюллетень № 43. М.: ФНМЦ по профилактике и борьбе со СПИДом ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора, 2018. [HIV infection: Information Bulletin № 43. Moscow: Federal scientific and methodological center for AIDS prevention and control Central research Institute «Central research Institute of epidemiology» of Rospotrebnadzor, 2018 (In Russ)].

4. Hemelaar J. Implications of HIV diversity for the HIV-1 pandemic. J. Infect., 2013 May, Vol. 66, No. 5, pp. 391–400. URL: DOI: 10.1016/j.jinf.2012.10.026.

5. Gaudy C., Moreau A., Brunet S., Descamps J.M., Deleplanque P., Brand D., Barin F. Subtype B human immunodeficiency virus (HIV) type 1 mutant that escapes detection in a fourth generation immunoassay for HIV infection. J. Clin. Microbiol., 2004, Vol. 42, pp. 2847–2849. 6. Ly T.D., Plantier J.C., Leballais L., Gonzalo S., Lemée V., Laperche S. The variable sensitivity of HIV Ag/Ab combination assays in the detection of p24 Ag according to genotype could compromise the diagnosis of early HIV infection. J. Clin. Virol., 2012, Vol. 55, pp. 121–127. URL: DOI: 10.1016/j.jcv.2012.06.012.

6. Qiu X., Sokoll L., Yip P., Elliott D.J., Dua R., Mohr P., Wang X.Y., Spencer M., Swanson P., Dawson G.J., Hackett J. Jr. Comparative evaluation of three FDA-approved HIV Ag/Ab combination tests using a genetically diverse HIV panel and diagnostic specimens.J. Clin. Virol., 2017 Jul., Vol. 92, pp. 62–68. URL: DOI: 10.1016/j.jcv.2017.05.005.

7. Баранова Е.Н., Шарипова И.Н., Денисова Н.М., Сусекина М.Е., Пузырев В.Ф., Саркисян К.А., Воробьева М.С., Бурков А.Н., Уланова Т.И. Возможности современных тест-систем при подтверждении ранней ВИЧ-инфекции // Вопросы вирусологии. 2009. Т. 54, № 5. С. 37–40. [Baranova E.N., Sharipova I.N., Denisova N.M. Susekina M.E., Puzyrev V.F., Sarkisyan K.A., Vorobyeva M.S., Burkov A.N., Ulanova T.I. The possibilities of modern test systems for the early confirmation of HIV infection. Questions of Virology, 2009, Vol. 54, No. 5, pp. 37–40 (In Russ.)].

8. Иванова Н.И., Пекшева О.Ю. Опыт выявления маркеров ВИЧ-инфекции с использованием нового ИФА-диагностикума ДС-ИФА-ВИЧ-АТ/АГ-СПЕКТР в лабораториях центров по профилактике и борьбе со СПИДом Приволжского Федерального округа // Клиническая лабораторная диагностика. 2009. № 3. С. 46–48. [Ivanova N.I., Peksheva O.Yu. Experience identifying markers of HIV with the new ELISA antigen of DS-ELISA-HIV-at/AG-SPECTRUM in the laboratories of the centers for the prevention and control of AIDS of the Volga Federal district. Clinical Laboratory Diagnostics, 2009, No. 3, pp. 46–48 (In Russ.)].

9. Распопина И.В., Панкова Л.В., Кожевникова И.В. Опыт выявления маркёров ВИЧ-инфекции с использованием нового ИФА-диагностикума Инвитролоджик ВИЧ 1,2-АГ/АТ // Вестник Челябинской областной клинической больницы. 2013. № 1 (20). С. 84. [Raspopina I.V., Pankova L.V., Kozhevnikov I.V. Experience of identifying markers of HIV with the new ELISA antigen of Envitrologic HIV-1,2-AG/AT. Bulletin of the Chelyabinsk Regional Clinical Hospital, 2013, No. 1 (20), pp. 84 (In Russ.)].

10. Шарипова И.Н., Ходак Н.М., Пузырев В.Ф., Бурков А.Н., Уланова Т.И. Сравнительное исследование специфичности тест-систем для диагностики ВИЧ-инфекции на категории образцов сывороток крови беременных женщин // Клиническая лабораторная диагностика. 2015. Т. 60, № 3. С. 38–41. [Sharipova I.N., Khodak N.M. Puzyrev V.F., Burkov A.N., Ulanova T.I. Comparative study of the specificity of test systems for the diagnosis of HIV infection in the category of blood serum samples of pregnant women. Clinical Laboratory Diagnostics, 2015, Vol. 60, No. 3, pp. 38–41 (In Russ.)].

11. Лисицина З.Н., Дмитриевская К.А., Коробан Н.В., Кондрашова Т.В. Иммунные тесты и диагностика острой стадии ВИЧ-инфекции // ВИЧ-инфекция и иммуносупрессии. 2017. Т. 9, № 2. С. 36–41. [Lisitsina Z.N., Dmitrievskaya K.A., Koroban N.V., Kondrashova T.V. Immune tests and diagnosis of the acute stage of HIV infection. HIV Infection and Immunosuppressive Disorders, 2017, Vol. 9, No. 2, pp. 36–41 (In Russ.)].

12. HIV assays: laboratory performance and other operational characteristics: rapid diagnostic tests (combined detection of HIV-1/2 antibodies and discriminatory detection of HIV-1 and HIV-2 antibodies): report 18. Geneva: World Health Organization, 2015.

13. Chaves P., Wesolowski L., Patel P., Delaney K., Owen S.M. Evaluation of the performance of the Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Assay. J. Clin. Virol., 2011 Dec., Vol. 52, Suppl. 1, pp. S51–S55. URL: DOI: 10.1016/j.jcv.2011.09.010.

14. Mitchell E.O., Stewart G., Bajzik O., Ferret M., Bentsen C., Shriver M.K. Performance comparison of the 4-th generation Bio-Rad Laboratories GS HIV Combo Ag/Ab EIA on the EVOLIS™ automated system versus Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo, Ortho Anti-HIV 1+2 EIA on Vitros ECi and Siemens HIV-1/O/2 enhanced on Advia Centaur.J. Clin. Virol., 2013 Dec., Vol. 58, Suppl. 1, pp. e79–e84. URL: DOI: 10.1016/j.jcv.2013.08.009. 16. Product Package Insert. ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Reagent Kit. USA: Abbott Laboratories.

15. Инструкция по применению ИФА тест-системы «Дженскрин Ультра ВИЧ Aг/Aт». Франция: Bio-Rad. [Instructions for use of ELISA test system Genscreen Ultra HIV AG/AТ. France: Bio-Rad (In Russ.)].

17. Лаповок И.А., Лопатухин А.Э., Киреев Д.Е. и др. Молекулярно-эпидемиологический анализ вариантов ВИЧ-1, циркулировавших в России в 1987–2015 гг. // Терапевтический архив. 2017. Т. 89, № 11. С. 44–49. [Lapovok I.A., Lopatukhin A.E., Kireev D.A. et al. Molecular epidemiological analysis of HIV-1 circulating in Russia in the years 1987–2015. Therapeutic Archive, 2017, Vol. 89, No. 11, pp. 44–49 (In Russ.)].

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ТЕСТ-СИСТЕМ ИФА/ИХЛА 4-ГО ПОКОЛЕНИЯ, ПРИМЕНЯЕМЫХ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Целью работы являлось сравнение пяти наиболее широко используемых на территории Российской Федерации тест-систем ИФА для обнаружения антител к вирусу иммунодефицита человека.Материалы и методы. В качестве материалов для сравнения были собраны 5442 образца сыворотки крови посетителей диагностических центров, пришедших на обследование по показаниям, не связанным с инфекциями, групп населения с высоким риском инфицирования ВИЧ, а также от пациентов с состояниями, при которых чаще всего могут возникнуть ложноположительные результаты исследований в ИФА. Дополнительно для оценки аналитических характеристик использовались сероконверсионные панели и панель вирусного разнообразия. В работе проводилось сравнение следующих тест-систем: Architect HIV Ag/Ab Combo (Abbott), Genscreen Ultra HIV Ag-Ab (Bio-Rad), КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ (АО «Вектор-Бест»), ДС-ИФА-ВИЧ-АГАТ-СКРИН (ООО «НПО «Диагностические системы»), ВИЧ-1,2-АГ/АТ (ООО «Медико-биологический союз»).Заключение. Диагностическая чувствительность всех тест-систем составила 100% за исключением одной (ООО «Медико-биологический союз»), у которой она оказалась равной 99,54%. Диагностическая специфичность варьировала от 99,58 до 99,89%, однако неожиданно сильно зависела от тестируемой популяции, снижаясь в группе пациентов с высоким риском инфицирования ВИЧ до 93,26% при использовании тест-системы АО «Вектор-Бест». Доля подтвержденных первично положительных результатов колебалась в диапазоне от 100% (Abbott) до 89,51% (АО «Вектор-Бест»). Анализ сероконверсионных панелей показал, что тест-системы незначительно отличались друг от друга, выявляя от 22,12% (ООО «НПО «Диагностические системы») до 27,88% (Abbott) образцов. При тестировании панели вирусного разнообразия большее количество образцов выявляли тест-системы зарубежных производителей (100% - Abbott и 85,9% - Bio-Rad). Наименьшее количество образцов панели было выявлено тест-системой ООО «Медико-биологический союз» (52,1%). Данная работа является единственным исследованием, где на обширной выборке было проведено сравнение серологических тест-систем 4-го поколения, широко использующихся в Российской Федерации для скрининга на ВИЧ-инфекцию. Полученные результаты позволяют оценить эффективность применения перечисленных тест-систем в рутинной диагностической практике.

COMPARATIVE EVALUATION OF THE 4TH GENERATION ELISA/CLIA ASSAYS USED FOR THE DIAGNOSIS OF HIV INFECTION IN THE RUSSIAN FEDERATION

The aim of the work was to compare the five most widely used ELISA diagnostic kits on the territory of the Russian Federation, which are used for screening for HIV infection.Materials and methods. 5442 samples from visitors of diagnostic centers who came for blood donation for non-infectious analyses, cohorts with a high risk of HIV infection, as well as patients with potentially interfering conditions were used as a material for the study. Additionally, seroconversion panels and a panel of viral diversity were used to evaluate the analytical characteristics. The following test systems were compared: Architect HIV Ag/Ab Combo (Abbott), Genscreen Ultra HIV Ag-Ab (Bio-Rad), CombiBest HIV-1,2 AG/AT (Vector-Best), DS-ELISA-HIVAGAT-SCREEN (Diagnostic Systems), HIV-1,2-AG/AT (Medical-Biological Union).Conclusion. The diagnostic sensitivity of all tests was 100% with the exception of one (Medical-Biological Union), in which it turned out to be 99,54%. Diagnostic specificity ranged from 99,58% to 99,89%, but unexpectedly strongly depended on the test population, decreasing on a group with a high risk of HIV infection to 93,26% (Vector-Best). The convergence between initial and repeat reactive samples ranged from 100% (Abbott) to 89,51% (Vector-Best). The results of the analysis of seroconversion panels showed that the tests differed slightly from each other, receiving positive results from 22,12% (Diagnostic Systems) to 27,88% (Abbott) samples. When testing the panel of viral diversity, diagnostic tests from foreign manufacturers showed better results, revealing 100% (Abbott) and 85,9% (Bio-Rad). The smallest number of panel samples was detected by the kit of the Medical-Biological Union (52,1%). This work is the only study where the 4th generation ELISA kits, widely used in the Russian Federation for screening for HIV infection, were compared in an extensive sampling. The results obtained make it possible to evaluate the effectiveness of the use of the listed kits in routine diagnostic practice.

Киреев Д.Е. 1 , Шипулин Г.А. 2 , Семенов А.В. 3, 5 , Тиванова Е.В. 1 , Чуланов В.П. 1 , Колясникова Н.М. 1 , Зуева Е.Б. 3 , Galli C. 4 , Покровский В.В. 1, 6

ВИЧ/СПИД – изменим ситуацию

088

Стигма и дискриминация

Одно из основных направлений в профилактике ВИЧ/СПИД – это формирование мотивации к здоровому образу жизни каждого жителя нашего города. Мы не должны также забывать о проблеме стигматизации, так как стигма стала неотъемлемой частью эпидемии ВИЧ-инфекции. Из-за стигмы человек, имеющий ВИЧ-инфекцию, стремится как можно дольше не раскрывать свой статус и старается демонстрировать поведение, соответствующее социальным ожиданиям общества. Некоторые ВИЧ-позитивные продолжают практиковать небезопасный секс, опасаясь, что изменение принятого сексуального поведения может вызвать подозрение в наличии ВИЧ-инфекции и, как следствие, привести к стигматизации и дискриминации. Связанная с ВИЧ стигма, которая существует во всех странах мира, приводит к отказу от тестирования на ВИЧ и от своевременного обращения за медицинской помощью. Стигма является существенным препятствием в борьбе с распространением ВИЧ/СПИДа, поэтому наше население должно формировать толерантное отношение к ВИЧ-позитивным.

Избежать заражения ВИЧ не сложно, правила профилактики просты, но, несмотря на это, количество ВИЧ-инфицированных людей постоянно растёт, что заставляет экспертов говорить об эпидемии и подчёркивать проблему информированности общества.

Знаете ли вы…

1 декабря — Всемирный день борьбы со СПИДом. 1981 год считается годом начала эпидемии СПИДа. Именно тогда ученые выявили первые случаи заболевания. Символом борьбы со СПИДом является красная ленточка.

ВИЧ-инфекцию не зря называют «чумой XX века» – как и против чумы в свое время, от нее до сих пор не найдено сколько-нибудь эффективного лекарства. Возможно лишь применять сдерживающие препараты для поддержания иммунитета. Поиски средства, полностью излечивающего от ВИЧ, продолжаются и остаются для ученых пределом мечтаний.

ВИЧ-инфекция – весьма распространенное вирусное заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека. В 2004-2005 гг. на планете официально насчитывалось около 40 млн. ВИЧ-инфицированных, из которых 98% составляли взрослые. К 2011 г. эта цифра увеличилась практически в 1,9 раза и, что особенно огорчает, неуклонно растет количество маленьких пациентов с ВИЧ-инфекцией. В нашей стране распространенность ВИЧ-инфекции в 2003-2004 гг. составляла 7 000 на 100 000 населения, к 2010 г. это количество увеличилось почти в 2,6 раза. Согласно данным статистики ВОЗ, около 8 500-10 000 человек заражаются ВИЧ-инфекцией ежедневно.

ВИЧ и СПИД

088

Самое распространённое заблуждение, что СПИД и ВИЧ — это два разных названия для одного явления. Это не так, потому что заразиться СПИДом невозможно — заражаются вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ). Именно он, попадая в кровь, начинает разрушать организм. Сначала ВИЧ никак не проявляется и не имеет явных симптомов. Но спустя время (от нескольких недель до года, чаще всего — через 6 месяцев) может возникнуть острая ВИЧ-инфекция, симптомы которой схожи с признаками других заболеваний: повышение температуры, боли в горле, в животе, тошнота, увеличение лимфатических узлов. Позже, когда самочувствие нормализуется, ВИЧ-инфекция переходит в латентную стадию, которая продолжается от 3 до 15 лет. Внешне человек чувствует себя здоровым, но вирус разрушает определённые клетки иммунной системы — CD4-лимфоциты. Когда их количество снижается до 200 клеток в 1 мл крови (норма для здорового человека — 500), то развиваются симптомы иммунодефицита: кандидоз полости рта, повышение температуры, потеря веса, частые острые респираторные инфекции, герпес.Если пациент не получает необходимого лечения, то инфекция развивается и наступает терминальная стадия — синдром приобретённого иммунодефицита (СПИД). Проявляется СПИД в виде ряда тяжёлых вторичных заболеваний, которых более 20. Это могут быть инфекционные и онкологические заболевания (туберкулёз, пневмония, цитомегаловирусная инфекция, токсоплазмоз головного мозга, саркома Капоши и другие). Именно эти заболевания в результате и приводят к гибели человека.

ВИЧ-инфекция – вирусная инфекция, вызывающая иммунодефицитное состояние у человека, однако не каждый носитель вируса болен СПИДом. От момента инфицирования ВИЧ до развития СПИДа может пройти очень большое количество времени, иногда несколько лет. Почти у 60% ВИЧ-инфицированных бессимптомный период течения инфекции составляет 5-7 и более лет.

СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита человека) – конечная стадия ВИЧ-инфекции, при которой состояние иммунной системы человека настолько угнетено, что она неспособна сопротивляться никаким видам инфекций. Даже безобидная простуда при СПИДе может стать причиной летального исхода.

Как избежать заражения ВИЧ-инфекцией?

Главное средство борьбы со СПИДом — это информация и понимание того, как передаётся инфекция.

Пути передачи ВИЧ-инфекции давно определены :

090

1. Половой — то есть при половом контакте с ВИЧ-инфицированным человеком.

2. Инъекционный и инструментальный — при использовании загрязнённых вирусом шприцев, игл, катетеров. Этот вид передачи инфекции наиболее актуален в среде людей, употребляющих инъекционные наркотики.

3 .Гемотрансфузионный — то есть после переливания инфицированной крови или её компонентов.

4 .Перинатальный — когда вирус передаётся от инфицированной матери к ребёнку.

5 .Молочный — происходит заражение ребёнка инфицированным молоком матери.

6 .Трансплантационный — при пересадке инфицированных органов, костного мозга.

7. Бытовой — когда заражение происходит через повреждённые кожные покровы и слизистые оболочки людей, контактирующих с кровью больных ВИЧ-инфекцией.

Соответственно путям заражения выделяются основные группы риска :

— Люди, употребляющие наркотики.
— Люди, вступающие в «случайные» половые связи, пренебрегая барьерной контрацепцией.
— Люди, пользующиеся услугами жриц любви.

ВИЧ не передается:

091

при рукопожатии или объятиях;

  • при пользовании столовыми приборами, постельными принадлежностями;
  • через предметы сантехоборудования, при пользовании бассейном, душем;
  • воздушно-капельным путем;
  • при совместных занятиях спортом;
  • в общественном транспорте; «кровь в кровь» – при использовании нестерильных игл, шприцев, пользовании чужими бритвенными принадлежностями, зубными щетками, маникюрными и педикюрными наборами.
    • После незащищенного сексуального контакта
    • В случае изнасилования
    • Если стало известно, что постоянный половой партнер имел сексуальные контакты с другими людьми
    • Если у полового партнера обнаружилась ВИЧ-инфекция
    • После проведения пирсинга или татуировки
    • После проведения процедуры переливания крови
    • При обследовании на другие заболевания, передающиеся половым путем
      • половым путем – при любом незащищенном (без презерватива) половом контакте;

      через животных или при укусах насекомых.

      Факт инфицирования после контакта с вирусом можно установить через 25 дней – 3 месяца (в некоторых случаях до 6 месяцев). Период между попаданием вируса в организм и образованием антител к нему называется «периодом окна», и в течение этого периода тестирование может показать отрицательный результат. Поэтому для получения достоверного результата необходимо сделать повторный анализ через 3-6 месяцев. В «период окна» в крови, сперме живущего с ВИЧ, вирус находится в концентрации, достаточной для инфицирования других людей.

      Основной путь передачи остается половой – 97%. Имеющиеся в торговой сети средства защиты населением приобретаются далеко не всегда. И чем старше человек, тем сложнее ему приобрести презервативы из-за сформированных возрастных комплексов, и еще проблематичнее использовать эти средства в связи с отсутствием необходимых практических навыков. Но чаще мы видим полное непонимание риска незащищенных половых контактов с партнерами неизвестного ВИЧ-статуса.

      Ежегодно регистрируются случаи, когда женщина узнаёт о своём ВИЧ-положительном статусе лишь при обращении в женскую консультацию по поводу беременности, иногда – на поздних сроках.

      В таких ситуациях назначение противовирусных препаратов может не дать эффекта, и существует высокий риск передачи инфекции ребёнку.

      Создание здоровой семьи и сохранение ее благополучия – это осознанный шаг, и тестирование на ВИЧ – не будет лишним.

      092

      Правила профилактики ВИЧ-инфекции исходят из логики путей передачи вируса :

      1. Ответственно относиться к своей жизни и здоровью. Это понятие включает в себя не только здоровый образ жизни и правильное питание, но и регулярные обследования, наблюдение у лечащего врача, внимание к своему состоянию и самочувствию.

      2. Ответственно относиться к своей сексуальной жизни. Важно помнить, что возможность заражения СПИДом ни для кого полностью не исключена, ведь даже одного полового контакта с заражённым партнёром иногда бывает достаточно для передачи вируса. Уменьшить вероятность заражения можно:

      — уменьшив число сексуальных партнёров;
      — интересуясь прошлыми половыми контактами своих партнёров и их отношением к наркотикам;
      — используя презервативы.

      3. Регулярно проходить профилактические обследования. Сдавать анализ крови на ВИЧ рекомендуется раз в год.

      4. Помнить о путях передачи ВИЧ-инфекции и максимально избегать данных ситуаций.

      5.Отказ от употребления наркотиков, использование только одноразовых шприцев и игл.

      Диагностика ВИЧ-инфекции

      Пройти обследование на ВИЧ следует в следующих случаях:

      После сексуального контакта с новым партнером

      Наиболее часто для диагностики ВИЧ-инфекции используется метод ИФА (ELISA) – метод прямого определения антител к ВИЧ. Проведение анализа возможно не ранее 3 недель - 6 месяцев после заражения, т.к. антитела к ВИЧ образуются в крови не сразу. Метод ИФА является высокочувствительным методом диагностики, его надежность составляет около 99,5%. При получении ложноположительных результатов через некоторое время возможно проведение повторного исследования.

      Иммуноблоттинг– специфичный и высокочувствительный метод определения ВИЧ-инфекции по методу белковых антигенов. Суть иммуноблоттинга – в выявлении антител к отдельным антигенам на нитроцеллюлозных мембранах, на которые нанесены специфические белки. При наличии антител к определенным антигенам в соответствующем локусе происходит окрашивание, что позволяет точно определить наличие ВИЧ-инфекции. При наличии двух положительных результатов иммуноблоттинга можно говорить о заражении ВИЧ-инфекцией.

      ПЦР-диагностика (определение ДНК и РНК вируса) – наиболее высокоточные методы определения ВИЧ-инфекции. Метод ПЦР может быть использован уже через 2-3 недели после предполагаемой даты инфицирования. Минусами метода является достаточно высокая стоимость исследования и большое количество ложноположительных результатов.

      Зачем нужно проходить тестирование на ВИЧ?

      Многие люди, живущие с ВИЧ, не знают об этом. У них нет никаких симптомов, вирус никак не проявляет себя. Тестирование дает два больших преимущества – вы сможете точно узнать свой статус и принять необходимые меры:

      - если ваш ВИЧ-статус окажется отрицательным, то вы сможете позаботиться о том, чтобы в дальнейшем защитить от инфекции себя и своих близких;

      - если ваш ВИЧ-статус окажется положительным, то вы сможете получить доступ к соответствующему уходу, поддержке и лечению, а также изучить способы поддержания собственного здоровья.

      Лечение ВИЧ-инфекции

      Лечение ВИЧ-инфекции подразумевает назначение противовирусной терапии, а также лечение сопутствующих заболеваний, передающихся половым путем. Некоторые из назначаемых препаратов имеют ряд противопоказаний и комплекс побочных эффектов, в связи с чем их прием должен быть регламентирован лечащим врачом только после прохождения соответствующего обследования.

      Жизнь с ВИЧ

      ВИЧ-инфекция фактически делит жизнь человека на жизнь «до» и жизнь «после». При получении точных данных о результате обследования на ВИЧ нужно быть честным со своими близкими и дать половому партнеру возможность выбора, каких бы моральных усилий это ни стоило: ведь даже защищенный барьерными методами (презерватив) секс с ВИЧ-инфицированным может быть опасен.

      Вовремя начатое лечение позволит поддерживать иммунную систему в «рабочем» состоянии, а своевременная проверка уровня лимфоцитов CD 4, свидетельствующего о вирусной нагрузке, позволит прогнозировать дальнейшее развитие вируса и проводить оценку используемой терапии.

      Кроме того, следует обсудить со своим лечащим врачом схему правильного сбалансированного питания, по возможности отказаться от вредных привычек (алкоголя и никотина), получать дозированную физическую нагрузку, укреплять иммунитет консервативными методами (по согласованию с лечащим врачом).

      Клиническая практика показывает, что в ряде случаев при соблюдении вышеперечисленных рекомендаций ВИЧ-инфицированным удавалось сохранить должное качество жизни, претерпевая лишь небольшую долю ограничений. Помните, никогда не стоит отчаиваться, надежда победить вирус есть всегда.

      Ваше поведение – Ваше здоровье!

      Информацию подготовила инструктор –валеолог Батюкова О.В.

      Человек имеет право жить!

      096

      Болезнь под названием СПИД прогрессирует ежегодно и уносит жизни миллионов людей.

      Для СПИДа не существует преград, он одинаково поражает мужчин, женщин и детей. Болезнь СПИД вызывается ВИЧ - вирусом иммунодефицита человека.

      Инфицированных людей называют ВИЧ-положительные. Однако лишь конечная стадия болезни называется СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита человека.

      ВИЧ передается тремя четко определенными путями:

      Таким образом, остальные пути, о которых вы можете услышать - лишь домыслы.

      Следующие утверждения являются истинной правдой:

      Кожа - непреодолимый барьер для ВИЧ.

      Такие насекомые, как комары, не переносят ВИЧ.

      Можно касаться, обниматься, целоваться с ВИЧ-положительным человеком, можно носить одежду ВИЧ-положительного человека.

      Можно пользоваться предметами и устройствами, туалетом, душем, бельем вместе с ВИЧ - инфицированным человеком.

      ВИЧ нельзя вдохнуть, нет его в слезах, поте, слюне, невозможно заразиться коснувшись зараженного человека.

      Знать - значит предупредить!

      Тесты - единственная возможность выявить или заражен ВИЧ человек или нет. Этот тест помогает выявить ВИЧ за несколько лет до того как разовьется болезнь. Он осуществляется через простой анализ крови.

      Если у Вас появились сомнения, Вы обеспокоены –

      Пройдите тест на ВИЧ! Обследование необходимо пройти через 3-6 месяцев после вероятного факта заражения.

      Тестирование на ВИЧ по желанию можно пройти анонимно и бесплатно.

      График работы:
      Забор крови 9.00 – 16.00 (понедельник – четверг)
      9.00 – 13.00 (пятница)
      Перерыв 13.00 – 14.00

      А так же анализ на ВИЧ-инфекцию можно сдать в любой поликлинике города Минска, в Минском городском и областном кожно-венерологических диспансерах, городском и областном наркологических диспансерах, а также в медицинском центре «Лоде» (платно, тел. 111). Результат исследования на ВИЧ будет готов в течение 2 рабочих дней. Тестирование на ВИЧ с использованием экспресс-тестов (быстрых тестов) проводится среди т.н. «групп риска» (потребители инъекционных наркотиков, женщины, вовлеченные в секс-бизнес, мужчины, имеющие сексуальные контакты с мужчинами) на некоторых АКП (анонимные консультативные пункты) и во время проведения дозорного эпидемиологического надзора за распространением ВИЧ среди групп повышенной уязвимости. Используются экспресс-тесты для определения антител к ВИЧ в крови и слюне, результат определяется визуально через 5-20 минут.

      ТАЙНА КОНСУЛЬТАЦИИ И ОБСЛЕДОВАНИЯ ГАРАНТИРУЕТСЯ!

      Знание о наличии болезни дает возможность своевременно начать адекватное лечение и предотвратить ее развитие и прогрессирование. Эффективность лечения заключается в том, что уменьшается количество вируса в крови. Таким образом, можно жить с вирусом и жить обычной жизнью. Однако, важно не забывать о мерах безопасности, о которых уже шла речь.

      ВИЧ-инфицированный - ты не одинок!

      Сегодня лечение, к сожалению, не может привести к выздоровлению, однако оно может вернуть к нормальному ритму жизни, поскольку лечение предотвращает размножение вируса и развитие болезни.

      Следует помнить,что если ты ВИЧ-инфицированный - ты не одинок. Необходимо присоединиться к ВИЧ-позитивным людям, пользуясь ассоциациями, центрами и т.п..

      В любом случае ВИЧ не может стать препятствием при приеме на работу или стать причиной прекращения трудовой деятельности. ВИЧ-позитивный человек не обязан ставить в известность работодателя о своем статусе.

      ВИЧ может коснуться каждого, поэтому важно предоставлять ВИЧ-инфицированным

      психологическую поддержку.

      ВИЧ-позитивный человек имеет право: вести личную жизнь, иметь друзей, получать информацию и образование.

      097

      Городской клинический детский психоневрологический диспансер-это грамотные специалисты, имеющие высокую квалификацию и необходимые познания в различных областях психиатрии, психотерапевты, психологи, невролог, логопед и др.).

      Состояния, при которых оказывается помощь:

      • страхи и тики;
      • различные навязчивые состояния;
      • энурез и энкопрез;
      • различные расстройства сна и поведения;
      • психотические состояния;
      • невротические реакции;
      • задержки речевого и психического развития;
      • расстройства речи;
      • проблемы воспитания;
      • суицидальные намерения.

      Городской клинический детский психоневрологический диспансер всегда открыт для общения с гражданами и детьми и помогает решить различные спорные вопросы и повышает грамотность населения в отношении психических заболеваний и различных психических состояний.

      Информируем вас о том, что на базе учреждения здравоохранения Городской клинический детский психоневрологический диспансер работает в круглосуточном режиме телефон Детской линии помощи.

      Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
      При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

      Читайте также: