Исследование группы ученых позволит усилить иммунный ответ на ВИЧ и гепатит » Медвестник

Обновлено: 25.09.2022

Результаты исследования международного коллектива ученых позволят разработать методы усиления иммунного ответа организма человека на ВИЧ, гепатиты B и C. Экспериментальная модель инфицирования мышей вирусами лимфоцитарного хориоменингита показала, как инфекция может становиться острой или хронической. Статья об исследовании опубликована в журнале Genome Research. Работа поддержана грантом Российского научного фонда.

Экспериментальный вирус лимфоцитарного хориоменингита (ВЛХМ) имеет много общего с ВИЧ. Оба представляют собой РНК-вирусы и очень схожи по особенностям иммунного ответа. Эти вирусы широко используют в иммунологии в качестве «золотого стандарта» для исследования механизмов острых и хронических инфекций. Развитие инфекционного заболевания во многом зависит от взаимодействия вирусных частиц с иммунной системой. Но для многих вирусов, в частности для ВИЧ, связь вирус–иммунитет до сих пор изучена недостаточно.

Группа ученых из нескольких стран провела исследование, в ходе которого вводила ВЛХМ мышам, а затем анализировала транскриптомы (все синтезируемые РНК) клеток селезенки инфицированных животных в различные моменты времени после заражения. Селезенка была выбрана потому, что именно она является главным органом, определяющим развитие иммунного ответа и течение инфекции.

«Мы показали, что отличительной чертой процесса истощения иммунного ответа является ослабление воспалительной реакции моноцитов – клеток врожденного иммунитета человека. Оказалось, что когда инфекция переходит из острой стадии в хроническую, происходит так называемое истощение иммунного ответа. Однако ученые обнаружили две группы клеток иммунной системы, которые обеспечивают активное ограничение распространения вируса в организме и переход в хроническую фазу инфекции. Как оказалось, всему виной взаимодействие Т-клеток иммунной системы, уничтожающих патогены в организме, и дендритных клеток, которые отвечают за клеточный антивирусный иммунитет. Этот факт имеет важнейшее значение для контроля распространения вируса при хронической фазе инфекции», – поясняет один из авторов работы старший научный сотрудник Института вычислительной математики им. Г.И. Марчука РАН доктор физико-математических наук Геннадий Бочаров.

В ходе работы ученые получили и проанализировали большое количество транскриптомных данных (РНК) по динамике и функциональной активности клеток иммунной системы. Используя эти результаты, ученые планируют провести исследования, чтобы выяснить, как можно искусственно воздействовать на иммунный ответ организма при лечении хронических инфекций.

«Мы хотим найти путь восстановления эффективности иммунных процессов в зараженных организмах. Такой путь особенно актуален для иммуномодулирующей терапии хронических инфекций человека, например, ВИЧ и вирусных гепатитов В, С. Полученные нами большие данные по динамике и функциональной активности клеток иммунной системы уже используются для построения и калибровки математической модели инфекции ВЛХМ. Наша конечная цель — исследовать чувствительность вирусной инфекции к многокомпонентным иммуномодулирующим воздействиям. Использование и дальнейшее развитие экспериментальной и математической моделей позволит перейти к разработке режимов оптимального управления динамикой вирусной инфекции для восстановления нормального функционирования иммунной системы у больных ВИЧ и другими хроническими инфекциями», – резюмирует Геннадий Бочаров.

Работа выполнена совместно с учеными из Университета им. Помпеу Фабры (Испания), Института науки и технологий Барселоны (Испания), Медицинского университета Вакаяма (Япония), Осакского университета (Япония) и Кантональной больницы Санкт-Галлена (Швейцария), сообщает пресс-служба Российского научного фонда.

Исследования вируса иммунодефицита человека – надежды и победы

1 декабря – Всемирный день борьбы со СПИДом. Каждый год к этой дате внимание учёных и людей всего мира обращается к новым достижениям в исследованиях ВИЧ.
Когда было установлено, что причиной СПИДа является вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), казалось, что создание вакцины – дело ближайшего будущего. C тех пор прошло более 25 лет и, несмотря на огромные материальные и интеллектуальные ресурсы, затраченные за это время, вакцина против ВИЧ-инфекции все ещё не создана.

Создание вакцин – история

Чтобы понять проблемы, осложняющие разработку вакцин против ВИЧ-1, поучительно рассмотреть обстоятельства успешной разработки вакцин в прошлом. Создание вакцины против оспы – одно из наиболее ярких достижений в истории медицины. Почему 200 лет назад, в отсутствии современных знаний, создание вакцины против оспы так быстро увенчалось успехом, в то время как создание вакцины против СПИДа остается нерешённой задачей уже более четверти века? Ответ заключается в том, что сама природа дала проницательному наблюдателю чёткие указания. Эдвард Дженнер обратил внимание на то, что молочницы, ранее переболевшие коровьей оспой, не заболевали оспой натуральной. Это наблюдение позволило установить факт перекрёстной иммунологической реакции двух родственных вирусов, позволяющий использовать вирус коровьей оспы для защиты от оспы натуральной.

Молочницы Дженнера представляли собой «защищённую группу», и это было ключевой информацией, необходимой для создания вакцины. В случае ВИЧ инфекции значительных по численности групп пациентов с чёткой резистентностью к этой инфекции не существует, и выяснить параметры иммунитета, которые коррелируют с защитой от инфекции, невозможно.

Другими проблемами, осложняющими разработку вакцин против ВИЧ-1, являются: отсутствие однозначного ответа на вопрос, какие из иммунных механизмов в защите от ВИЧ являются ключевыми; необычно высокая генетическая и, как следствие, антигенная изменчивость ВИЧ; способность вируса и его отдельных компонентов индуцировать механизмы угнетения и нарушения иммунитета; отсутствие адекватных экспериментальных животных для моделирования ВИЧ-инфекции, а также тот факт, что заражение ВИЧ может происходить как с помощью «свободных» вирусных частиц, так и «спрятанных» внутри инфицированных вирусом клеток хозяина. Поэтому вакцина должна стимулировать как гуморальный (В-клеточный) иммунный ответ, способный нейтрализовать «свободный» вирус, так и Т-клеточный иммунный ответ, который вызывает разрушение инфицированных вирусом клеток с помощью вирус-специфических цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ).

Известные подходы

Для создания вакцин против ВИЧ были испробованы практически все известные подходы, однако все они оказались бесперспективны.

Использование аттенуированного или инактивированного вируса связано с опасностью инфицирования, иммунитет ограничен очень узким кругом вирусных изолятов, а продолжительность иммунитета достаточна мала и не генерируется ЦТЛ.

Использование полноразмерных вирусных антигенов для создания рекомбинантных вакцин также осложнено: во-первых, требуется использование большого числа рекомбинантных антигенов ВИЧ-1, многие из которых достаточно сложно получить с использованием генноинженерных систем их синтеза; во-вторых, ВИЧ-1 имеет множество изменённых штаммовых вариантов, что также делает малоэффективным использование полноразмерных антигенов, в-третьих, полноразмерные вирусные антигены, являются потенциальными онкогенами и содержат районы, которые могут либо ингибировать протективный иммунитет, либо индуцируют развитие иммунопатологии.

Все эти проблемы ограничивают возможность использования традиционных подходов для создания вакцин против ВИЧ-1 и требуют разработки новых нетрадиционных подходов.

Новое поколение вакцин

На наш взгляд, одним из наиболее перспективных и обещающих подходов к созданию нового поколения надёжных и безопасных вакцин против ВИЧ-1 связан с созданием искусственных полиэпитопных вакцин на основе специально отобранных В- и Т-клеточных эпитопов. Такие вакцины должны содержать только те эпитопы, которые необходимы для формирования специфического иммунитета, и должны быть лишены недостатков, которые присущи субъединичным вакцинам и вакцинам, разрабатываемым на основе аттенуированного или инактивированного вируса. Искусственные полиэпитопные конструкции имеют потенциал, который позволяет улучшить иммунный ответ против ВИЧ-1 по сравнению с иммунитетом, индуцируемым при естественной ВИЧ-инфекции.

Как получают искусственные полиэпитопные иммуногены?

Вначале проводится анализ структуры вирусных белков и отбираются наиболее важные в иммунологическом плане эпитопы. При этом отбрасываются те эпитопы, которые могут вызвать нежелательные последствия. Затем осуществляется компьютерный дизайн искусственной белковой молекулы и рассчитывается соответствующая нуклеотидная последовательность искусственного гена. Ген синтезируют в пробирке путём химико-ферментативного синтеза и встраивают в подходящую векторную молекулу для его экспрессии в клетках бактерий, животных или растений. Данный подход использовался нами при конструировании двух искусственных полиэпитопных конструкций TBI и TCI.

Искусственные иммуногены - TBI и TCI

Первый полученный нами искусственный иммуноген был белок TBI. Он включает четыре Т-клеточных эпитопа и пять В-клеточных нейтрализующих эпитопов и сконструирован в виде белка с заранее заданной третичной структурой. Белок TBI прежде всего проектировался для индукции В-клеточного ответа, поэтому предсказанная структура эпитопов в составе белковой молекулы должна была обеспечить их распознавание иммунной системой и высокий уровень ответа. И действительно, созданный нами искусственный белок сохранил иммунологическую активность, поскольку его узнавали антитела из сыворотки больных ВИЧ-1. Кроме того, впервые для белка с гипотетически заданной третичной структурой были выращены кристаллы. Поскольку известно, что только природные белки способны к кристаллизации, этот факт является подтверждением того, что белок TBI по своей структуре подобен природным белкам. И самое главное – у мышей и обезьян, иммунизированных белком TBI, регистрируется появление ВИЧ-специфических антител, обладающих способностью нейтрализовать ВИЧ-1 на культуре клеток человека.

При конструировании белка TCI были выбраны эпитопы, высоко консервативные для 3-х основных субтипов ВИЧ-1, что может позволить обойти высокую вариабильность вируса. Чтобы выбранные эпитопы не обладали способностью индуцировать аутоиммунные реакции, были исключены нежелательные эпитопы, которые потенциально могут индуцировать антитела, обладающие перекрёстной специфичностью с нормальными клеточными белками. В результате белок TCI имеет более 80 оптимально отобранных эпитопов и является самым представительным среди известных полиэпитопных конструкций.

Кандидатные вакцины

На основе иммуногенов TBI и TCI на «Векторе» созданы две кандидатные вакцины КомбиВИЧвак и Сал-ВИЧ «Д», содержащие ДНК- и белковые эквиваленты TBI и TCI.

КомбиВИЧвак представляет собой комбинацию двух искусственных иммуногенов, один из которых - белок TBI. Вакцина сконструирована в виде вирусоподобных частиц. На её поверхности расположено большое число молекул TBI, что позволяет значительно увеличить иммуногенность вакцинной конструкции. Один из основных показателей эффективности вакцины – способность индуцировать антитела, которые не только узнают, но и нейтрализуют вирус. Наши результаты показали, что сыворотки мышей, иммунизированных КомбиВИЧвак, эффективно подавляют репликацию вируса на культуре клеток, инфицированных вирусом ВИЧ-1, причём на том же уровне, что и сыворотки, полученные от ВИЧ-инфицированного человека. Т.о., кандидатная вакцина КомбиВИЧвак обладает рядом уникальных свойств: она объединяет В- и Т-клеточные иммуногены в одной конструкции, индуцирует как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ, а эпитопы, входящие в состав её полиэпитопных иммуногенов, являются консервативными и представлены разными белками ВИЧ-1.

Кандидатная рекомбинантная вакцина Сал-ВИЧ «Д» предназначена для активации ВИЧ-специфического системного и мукозального звена иммунитета. Исследование специфической активности вакцины Сал-ВИЧ «Д» на лабораторных животных показало, что и эта вакцина эффективно стимулирует необходимый иммунный ответ.

Препараты КомбиВИЧвак и Сал-ВИЧ «Д» могут рассматриваться не только как профилактические, но и как терапевтические вакцины, поскольку они индуцируют иммунные ответы, способные уничтожать инфицированные клетки-мишени.

Проведённые доклинические испытания показали, что вакцины Комби-ВИЧвак и Сал-ВИЧ «Д» не оказывают негативного влияния на гематологические и морфологические показатели и являются безвредными и хорошо переносимыми. Полученные материалы не содержат данных, которые могли бы препятствовать проведению клинических испытаний кандидатных вакцин КомбиВИЧвак и Сал-ВИЧ «Д». Однако оправдают ли эти вакцины возлагаемые на них надежды и станут ли они использоваться в широкой медицинской практике покажут только дальнейшие клинические испытания.

Лариса Ивановна Карпенко,
д.б.н., зав. лабораторией разработки средств иммунопрофилактики
Сергей Иванович Бажан,
д.б.н., зав. теоретическим отделом,
Александр Алексеевич Ильичёв,
д.б.н., профессор, зав. отделом иммунотерапевтических препаратов

Экспериментальная группа по вич

Экспериментальное лекарство от рака в ВИЧ

Новое в лечении ВИЧ-инфекции

Вирус иммунодефицита человека стал проблемой для сотен тысяч пациентов во всем мире. Ученые во многих странах находятся в постоянном поиске решения данной проблемы. Для лечения многих пациентов используют как классические способы лечения ВИЧ и СПИДа, так и экспериментальные препараты, способные победить недуг навсегда. Так, недавно учеными было опубликованы результаты лечения пациентов с ВИЧ-инфекцией новым препаратом GS-9620. Изначально лекарство разрабатывалось для лечения гепатита. Однако позднее врачам удалось установить стойкое улучшение иммунных функций у ВИЧ-инфицированных пациентов после приема этого препарата. Уже сегодня можно говорить о возможности выпуска препарата в массовое производство и применении его для лечения ВИЧ-инфекции.

Однако не только проблематикой заболеваемости ВИЧ занимаются ученые во всем мире. Сегодня сложилась тенденция к разработке новых препаратов от других сложных болезней, таких как рак. Что может предложить пациентам современная медицинская наука в сфере экспериментального лечения?

Экспериментальное лечение за рубежом: основные тенденции

Сегодня люди, которые едут на лечение за рубеж, часто рассчитывают на получение новых и эффективных методов лечение тех или иных заболеваний. Однако многие пациенты едут за границу для прохождения экспериментального лечения новейшими и ультрасовременными препаратами. Такие лекарства разрабатываются в научно-исследовательских лабораториях по всему миру.

Это означает, что у больного появляется реальный шанс прохождения лечения сложного заболевания при помощи методик, которые не используют больше ни в одной клинике мира.

Зачастую участие в подобных экспериментальных программах проводится на добровольной и бесплатной основе. Одним из основных направлений экспериментальной медицины является лечение рака. В таких случаях больной делает свой вклад в развитие науки и получает шанс на полное исцеление. Подобное лечение проводят опытные специалисты, которые гарантируют контроль состояния пациента на всех этапах лечения. К тому же, вся ответственность в процессе лечения лежит именно на врачах.

Для проведения клинических испытаний пациентов делят на 2 группы. В первой группе проводится традиционное плацебо, а во второй группе используют экспериментальные методики. Распределение пациентов в такие группы производится автоматически, врач и больной никак не могут повлиять на этот процесс. Только после распределения больные узнают, в какую из групп они попали.

Также важно понимать, что подобное лечение не несет для больного никаких рисков для здоровья. Дело в том, что испытания препаратов и методик лечения на человека происходит после подтверждения безопасности способа лечения и проведения клинических подготовительных испытаний. Только тогда, когда врачи уверены в безопасности методики, они приступают к лечению больных.

В таких случаях могут быть три сценария развития событий:

  • пациент продлит себе жизнь,
  • больной полностью излечится,
  • лечение не даст никаких результатов (методика не сработала, либо использовалось плацебо).

Какие методики экспериментального лечения помогают лечить рак?

Участников лечения отбирают по таким критериям:

  • начало метастатического процесса (наличие единичных очагов метастазов),
  • неэффективность гормонотерапии (больные, прошедшие химическую или хирургическую кастрацию),
  • больные, не проходившие химиотерапевтического лечения (допустимо применение первичной химиотерапии).

Для того, чтобы стать участником экспериментальной программы, пациент должен соответствовать хотя бы одному из перечисленных критериев, а также пройти диагностику и получить одобрение руководителя научной группы, проводящего исследование.

При прохождении такого лечения пациент пребывает в клинике раз в 21 день на протяжении 2-3 дней. Те пациенты, которые не являются на прохождение очередного этапа терапии, исключаются из программы. Курс подобного лечение может длиться до получения позитивных результатов или до ухудшения состояния больного.

© 2022 Пермский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

Еще одна экспериментальная вакцина против ВИЧ не оправдала ожиданий

Компания Johnson & Johnson озвучила результаты второй фазы клинических испытаний экспериментальной вакцины против ВИЧ-инфекции (HVTN 705), которая началась в 2017 году в Африке. Из-за низких показателей эффективности дальнейшие исследования проводиться не будут.

Еще одна экспериментальная вакцина против ВИЧ не оправдала ожиданий

Еще одна экспериментальная вакцина против ВИЧ не оправдала ожиданий / Фото: motortion / Depositphotos

Что не так с вакциной Johnson & Johnson

HVTN 705 — это мозаичная аденовирусная векторная вакцина, которая включает фрагменты белков основных штаммов вируса. Схема введения препарата предполагает четырехкратную вакцинацию в течение года, и в состав третьего и четвертого компонента входит адъювант — ингредиент, усиливающий иммунный ответ. В клинических испытаниях Imbokodo участвовали около 2,6 тысячи молодых женщин из пяти стран южной части Африки, где на женское население приходится до 63% новых случаев ВИЧ. Участницы были разделены на две группы, половина из них получила плацебо.

Первичный анализ был проведен через 24 месяца после введения первого компонента прививки. После оценки уровня заражения в обеих группах ученые выяснили, что эффективность вакцины составила всего 25,2%. При этом у препарата не выявлено серьезных побочных эффектов, все женщины хорошо перенесли вакцинацию.

Разбираемся, какая технология надежнее и кому стоит провериться как можно скорее.

Однако надежды на получение эффективной и безопасной вакцины против ВИЧ еще остаются: в настоящее время компания проводит третью фазу клинических испытаний Mosaico вакцины HVTN 706, которая создана по той же технологии, но предполагает другой состав препарата и схему введения. Исследования проводятся в странах Северной и Южной Америки и Европы с участием мужчин-гомосексуалов и трансгендеров.

В начале 2020 года в Южно-Африканской Республике было остановлено клиническое исследование вакцины против ВИЧ. В нем принимали участие более 5 тысяч жителей жителей ЮАР. В результате вакцина продемонстрировала защиту от вируса всего на 30% у привитых по сравнению с группой плацебо.

От каких еще заболеваний до сих пор нет вакцин?

Клещевой боррелиоз (болезнь Лайма). Инфекция широко распространена в Сибири и западной части России. В отличие от клещевого энцефалита, боррелиоз хорошо поддается лечению, но риск заражения им в три раза выше. Поздно начатая терапия может привести к поражению костей и суставов. Болезнь Лайма способна также поражать разные органы на разных стадиях заболевания, включая сердце и головной мозг.

В 1998 году в США одобрили рекомбинантную вакцину против болезни Лайма LYMErix, которая по результатам клинических испытаний снизила заболеваемость среди привитых почти 80%. Но спустя три года разработчики добровольно сняли вакцину с рынка на фоне многочисленных заявлений в СМИ о тяжелых побочных эффектах у привитых. По мнению некоторых ученых, шумиху спровоцировали активисты антипрививочных организаций.

Геморрагическая лихорадка Эбола. Это смертельное заболевание родом из Африки сопровождается сильным кровотечением и полиорганной недостаточностью, а шансов выжить у зараженных очень мало. И хотя с 2014 года произошло уже две мощные эпидемии Эболы в странах Африки, а спорадические вспышки регистрируются почти каждый год, ни один препарат не был сертифицирован для лечения лихорадки. Все вакцины, включая те, которые разрабатывались в России, еще не прошли полный цикл клинических исследований.

Экспериментальная инъекция UB-421 может произвести революцию в лечении ВИЧ


С момента регистрации первого случая ВИЧ-инфекции лечение данного заболевания прошло долгий путь. Сегодня пациенты имеют возможность принимать различные комбинации АРВТ, включающие десятки лекарств, для предотвращения развития инфекции и разрушения их иммунной системы.

Однако прием антиретровирусной терапии требует ежедневного внимания. Пропуски способны дать вирусу шанс развить устойчивость к лекарственным средствам и привести к вирусологическому всплеску.

В новом исследовании, опубликованном в New England Journal of Medicine, исследователи из тайваньской United BioPharma сообщили о получении обнадеживающих результатов испытаний одной из перспективных инъекций, действие которой блокирует проникновение ВИЧ в клетки и не требует ежедневного приема таблеток.

В исследовании приняли участие 29 человек, которым был поставлен диагноз «ВИЧ-инфекция» и которые принимали антиретровирусное лечение в среднем около пяти лет.

Все добровольцы были случайным образом разделены на группы для получения одной из двух доз антитела UB-421, вводимого инъекционно.

Как пояснили специалисты, после введения в организм пациента экспериментальное антитело прикреплялось к тем же участкам оболочки иммунных клеток, которые ВИЧ использует для интеграции.

Идея заключается в том, что UB-421, будучи абсолютно безвредным для организма, выступает в качестве «конкурента» ВИЧ при «захвате» указанных областей, предотвращая тем самым проникновение вируса в клетку и ее заражение. Более того, UB-421, имея аффинность связи с иммунными клетками в 50-100 раз выше, чем ВИЧ, способно даже выбивать вирус из мест «прикрепления», когда процесс контакта уже состоялся.

Участники исследования получили восемь инъекций: одна группа прививалась один раз в неделю, другая - раз в две недели, но с более высокой дозировкой.

В течение всего периода наблюдений (от 8 до 16 недель) все 29 человек поддерживали неопределяемый уровень вирусной нагрузки, указывая на то, что объем и частота инъекций были выбраны верно.

«Мы смогли достичь длительного поддержания неопределяемой вирусной нагрузки, используя лишь один препарат вместо комбинации», - говорит Чанг-Йи Ванг, главный научный сотрудник и председатель совета директоров компании.

«Столь длительная вирусная ремиссия беспрецедентна, и она открывает множество новых потенциальных вариантов лечения для пациентов с ВИЧ, имеющих риск развития резистентности».

Исследование является первым шагом к тому, чтобы дать пациентам возможность отказаться от ежедневного приема медикаментов и обеспечить более длительный контроль над вирусом. В ближайшее время тайваньские специалисты планируют изучить работу UB-421 на группе людей с недавно диагностированной ВИЧ-инфекций, которые еще не принимают АРВТ. По их словам, это позволит оценить, способно ли антитело взять под контроль вирус сроком до шести месяцев.

Ван надеется, что результаты будут положительными. Анализ данных текущего исследования уже позволяет предположить, что возможны более длительные ремиссии. Антитело UB-421 не только блокировало инфицирование ВИЧ новых клеток, но также, по-видимому, модифицировало иммунные клетки участников исследования таким образом, чтобы они могли лучше бороться с вирусом.

UB-421, по-видимому, «активировал» определенные части иммунитета для лучшего распознавания и уничтожения вируса, включая скрытые резервуары.

«Мы считаем, что [UB-421] может стать отличным средством для активации Т-клеток в целях выполнения многих задач, включая очистку организма от вируса», - говорит ученый.

Если иммунную систему удастся «перепрограммировать» на более эффективную борьбу с ВИЧ, это позволит заметно повысить периоды вирусной ремиссии без применения АРВТ, а, возможно, достичь и «функционального излечения ВИЧ» - ситуации, когда UB-421 предоставит пациентам возможность поддерживать неопределяемый уровень ВИЧ без необходимости приема таблеток или повторных инъекций антител.

«Мы не знаем наверняка, к чему приводит «пассивная» работа антител, - говорит д-р Энтони Фаучи, директор Национального института аллергии и инфекционных заболеваний США, частично поддержавший исследование. - Но что-то происходит, чтобы вызвать хотя бы частично - не идеально - лучшие иммунные реакции, чем те, что есть у организма изначально».

Д-р Фаучи отмечает, что UB-421 работает, имитируя вход в иммунные клетки, которые ВИЧ использует для проникновения и инфицирования.

Сам ученый и его коллеги из других стран также занимаются изучением антител, называемых широко нейтрализующими антителами (bNabs), которые, связываясь с самим ВИЧ, предотвращают заражение им клеток.

По словам Фаучи, в качестве эффективного длительного лечения инфекции без постоянного приема таблеток может использоваться комбинация таких агентов, как UB-421 и широко нейтрализующих антител, которые воздействуют на ВИЧ сразу «с двух сторон».

«Нечто подобное может стать нокаутирующим ударом», - считает американский специалист.

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Читайте также: